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PRIMO 各种应用的FAQ汇总2
177 人阅读发布时间:2020-11-10 14:59
- PRIMO模组的FAQ
注:以下FAQ内容来源于:
https://www.alveolelab.com/faq_topic/the-primo-module/
问1:PRIMO模块里面内置的是什么类型的激光?
答:PRIMO模块里包括的是375nm的紫外激光器(UV laser)。
问2:激光的功率是多少?
答:从管状透镜(tube lens)射出的激光的功率是6mW-8mW。在物镜出口,激光的功率不同,取决于物镜的选择。当使用Nikon S Plan Fluor ELWD 20x/0.45参考物镜时,激光的功率是:5mW-6mW,光强大概是29mW/mm2。
问3:PRIMO模块的尺寸和重量是多少?
答:PRIMO模块的尺寸是:46.2 x 32.5 x 7.2cm(长x宽x高)。它的重量是15kg,由安装时提供的支架支撑。
- 专用的Leonardo软件的FAQ
注:以下FAQ内容来源于:
https://www.alveolelab.com/faq_topic/the-dedicated-leonardo-software/
问1:Leonardo软件的特征是什么?
答:(1)相同的图像的复制(设置排或列,调整间距);
(2)重新排列连续的图案,或将图案排列在微结构上(预览、旋转);
(3)图像梯度的管理。
问2:图像是如何画上去的?
答:我们推荐用Inkscape软件绘制图像(开源的矢量设计软件,类似Adobe Illustrator),可以在此获得“使用指导”(user guide)。这个软件可以创造像素大小的,或毫米大小的图案,并按照Leonardo软件可识别的不同的文件类型进行保存。
问3:可以使用什么类型的图像文件?
答:要生成蛋白图案的图像文件格式必须是:tif格式(像素)或pdf格式(公制尺码)。
- 光照图案化平台和试剂的FAQ
注:以下FAQ内容来源于:
https://www.alveolelab.com/faq_topic/photopatterning-platform-and-reagents/
问1:什么样的设备能安装使用PRIMO模组?
答:(1)安装有对焦维持系统(focus maintaining system)的倒置显微镜【1】:
- Nikon Ti-E 和 Ti-2
- Leica DMi8
- Olympus IX83
(3)有电动X/Y载物台;
(4)有照相机;
(5)有计算机;
(6)有等离子体反应器(又称电浆机)(plasma reactor)和专用的泵(dedicated pump)【2】。
【1】按需可提供完整的显微镜配置;
【2】可根据实验条件进行选择。
问2:用PRIMO进行蛋白光图案化时需要用到哪些耗材和试剂?
答:用到的耗材和试剂包括:
(1)PLPP溶液 1x;
(2)用玻璃或塑料制作的标准细胞培养基质(载玻片、盖玻片、培养皿、3D设备,等),或预先用抗污聚合物处理过的基质;
(3)预先切割好的PDMS stencils(PDMS模板)(自由设计)【3】;
(4)石蜡封口膜(parafilm);
(5)尖头镊子;
(6)微量移液器和适合的枪头;
(7)在10mM HEPES pH=7.4中配置的PLL-PEG 1x溶液【4】;
(8)待粘附的蛋白的溶液,C=10-100µg/mL;
(9)PBS 1x溶液,pH=7.4。
【3】可选项;
【4】推荐在没有预处理的基质上进行抗污表面处理。